L’itinerario è interamente segnalato da Nord a Sud con segnaletica verticale conforme a quanto stabilito dal Codice della Strada. L’installazione è avvenuta nel 2024 e ha permesso di rendere permanente e immediatamente riconoscibile la direttrice di Appennino Bike Tour, via d’accesso slow alle aree interne.
La segnaletica ha un colore di fondo marrone e riporta la dicitura Appenino Bike Tour in colore bianco, oltre al simbolo della bicicletta in colore bianco su fondo blu.
I segnali installati sono urbani (dritto, destra e sinistra) ed extraurbani (destra e sinistra) e permettono di orientarsi sul percorso senza necessariamente seguire una traccia gpx. Essi si trovano lungo tutti i 3100 km della ciclovia, consentendo di orientarsi ad ogni incrocio.